1. Каталог >
  2. Реактивы, наборы, расходные материалы >
  3. Виды реактивов >
  4. Клик-химия >
  5. Клик-химия по назначению >
  6. Клик-химия для Пост-Трансляционной модификации белков >

Посттрансляционная модификация - AMPylation


N6 КЛИК-функционализация АТФ: идентификация субстрата АМФ-трансферазы с помощью нерадиоактивной in vitro АМФилации (AMPylation)

АМФилации (AMPylation) - недавно обнаруженная пост-трансляционная модификация, которая характеризуется ковалентной модификацией гидроксильных групп белка (серин, треонин или тирозин) аденилил 5ʹ-монофосфатом (AMP), катализируемой специфической АМФ трансферазой[1,2].

Традиционный способ селективного мечения АМФилированных белков основан на сочетании радиоактивного мечения с 32P-альфа-АТФ и целевой масс-спектрометрии.

Grammel et al.[1] опубликовал нерадиоактивный вариант in vitro АМФилации, где Алкин-модифицированная АТФ (N6-propargyl-ATP/N6pATP) успешно используется для АМФилирования как очищенных белкво, так и белков в составе клеточных экстрактов.. Получившийся АМФилированный субстрат может быть впоследствие обработан в медь-катализируемой клик-реакции с целью:


Click Chemistry
Рисунок 1 Процесс in vitro АМФилирования белков N6pATP (модифицированном соответственно [1]). Этап 1: Ферментативноен АМФилирование и одновременная этинил-функционализация белка-субстрата. Этап 2: Cu(I)- катализируемое мечение АМФилированного этинил-функционализированного белкового субстрата . Этап 3: Детекция при помощи A) гель-флуоресцентного анализа or B) масс-спектрометрии.


[1] Grammel et al. (2011) A Chemical Reporter for Protein AMPylation. J. Am. Chem. Soc. 133:17103.
[2] Broncel et al. (2012) A New Chemical Handle for Protein AMPylation at the Host-Pathogen Interface. ChemBioChem 13:183.

НазваниеКодЦена Количество
L pack CLK-NU-001-5 73569.21 руб. 5 mg
S pack CLK-NU-001-1 18367.65 руб. 1 mg




Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой