1. Каталог >
  2. Jena Bioscience >
  3. Нуклеозиды, Нуклеотиды и их аналоги >
  4. Нуклеотиды >
  5. Нуклеотиды по применению >
  6. РНК >

5'-Capping


КЭП-аналоги - повышение стабильности мРНК и эффективности трансляции.

Многие эукариотические и вирусные мРНК модифицированы на их 5' концах присоединением 7-метил-гуанозина или m7G, известного как "КЭП". "Capping" структуры мРНК играет существенную роль в различных клеточных поцессах, включающих инициацию трансляции[1], сплайсинг[2], внутриклеточный транспорт[3] и обмен веществ[4].

Соответственно, успешные последующие применения in vitro транскрибированной мРНК сильно зависят от 5' КЭП структуры. КЭПированная мРНК в целом более эффективно транслируется в in vitro трансляционных системах на основе ростков пшеницы и ретикулоцито[5], и она менее восприимчива к деградации экзонуклеазой во время процедуры микроинъекции по сравнению с не-КЭПированной мРНК[6].

Синтез КЭПированной мРНК осуществляется в процессе in vitro транскрипции посредством РНК полимеразы бактериофага (T7, SP6 или T3) , которая ко-трансляционно встраивает аналог КЭП в 5'-конец транскрипта (Рис.1).

Реакция с традиционными КЭП аналогами (GpppG, m7GpppG или m2,2,7GpppG) обычно дает выход смеси мРНК, содержащей КЭП-аналоги как правильно, так и противоположно ориентированные[7]. Поэтому только около 50% КЭПированной мРНК распознается трансляционным аппаратом. Эффективность трансляции, однако, может быть заметно увеличена использованием "anti-reverse" КЭП аналога (ARCA, m7,3'-OGpppG)[8]. Это связано с замещением 3'-OH m7 гуаниновой группы 3'-O-метиловой группой, что заставляет ARCA встраиваться в правильном положении и итоговый результат оказываетя в районе 100% транслируемой мРНК.

RNA CappingRNA Capping
Рисунок1: КЭП аналоги ферментативно встраиваются в 5'-конец РНК в in vitro транскрипции посредством РНК-полимеразы бактериофага

[1] Gingras et al. (1999) eIF4 initiation factors: Effectors of mRNA recruitment to ribosomes and regulators of translation. Annu. Rev. Biochem. 68:913.
[2] Izaurralde et al. (1994) A nuclear cap binding protein complex involved in pre-mRNA splicing. Cell 78:657.
[3] Izaurralde et al. (1992) A cap binding protein that may mediate nuclear export of RNA polymerase II-transcribed RNAs. J. Cell Biol. 118:1287.
[4] Beelman et al. (1998) An essential component of the decapping enzyme required for normal rates of mRNA turnover. Nature 382:642.
[5] Paterson et al. (1979) Efficient translation of prokaryotic mRNAs in a eukaryotic cell-free system requires addition of a cap structure. Nature 279:692.
[6] Drummond et al. (1985) The effect of capping and polyadenylation on the stability, movement and translation of synthetic messenger RNAs in Xenopus oocytes. Nucl. Acids Res. 13:375.
[7] Pasquinelli et al. (1995) Reverse 5' caps in RNAs made in vitro by phage RNA polymerases. RNA 1:957.
[8] Grudzien et al. (2007) Synthesis of Anti-Reverse Cap Analogs (ARCAs) and their Applications in mRNA Translation and Stability. Methods Enzymol. 431:203.

НазваниеКодЦена
1 mg pack NU-854-1 13869.65 руб. 1 mg
5 mg pack NU-854-5 40627.32 руб. 5 mg



НазваниеКодЦена
L pack NU-854L 35288.62 руб. 5 x 10 µl
(100 mM)
S pack NU-854S 7818.61 руб. 10 µl
(100 mM)



НазваниеКодЦена
1 mg pack NU-855-1 12659.44 руб. 1 mg
5 mg pack NU-855-5 57228.16 руб. 5 mg



НазваниеКодЦена
L pack NU-855L 43984.75 руб. 5 x 10 µl
(100 mM)
S pack NU-855S 9774.04 руб. 10 µl
(100 mM)



НазваниеКодЦена
1 mg pack NU-853-1 13869.65 руб. 1 mg
5 mg pack NU-853-5 47086.2 руб. 5 mg



НазваниеКодЦена
1 mg pack NU-852-1 13869.65 руб. 1 mg
5 mg pack NU-852-5 40627.32 руб. 5 mg



НазваниеКодЦена
L pack NU-852L 35288.62 руб. 5 x 10 µl
(100 mM)
S pack NU-852S 7818.61 руб. 10 µl
(100 mM)




Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой