Контакты и реквизиты >>
+7(499)397-01-09
info@sputnniic-group.ru
Главная > Новости >

Производство антигенов с помощью LEXSY (системы синтеза эукариотических рекомбинантных белков)

Антигены вирусов и трипаносом, синтезированные LEXSY


Якорный белок вируса Хендра.

Вирус Хендра - это парамиксовирус, австралийский эндемик, поражающий человека и лошадей. Он демонстрирует высокую летальность, но низкую контагиозность и был впервые описан в 1994 г[1]. Инфицирование происходит при помощи присоединения к мембранным комплексам и слияния гликопротеинов, которое необходимо для слияния вируса и клеточной мембраны хозяина[2].
При помощи LEXSY удалось успешно синтезировать растворимый, гликозилированный якорный белок вируса Хендра (sHeV G) (Fischer et al., 2016)[3]. Активность антигена была подтвеждена тестом на рецепторное связывание и нейтрализацией инфекции с использованием сыворотки, полученной с sHeV G. Таким образом показана возможность использования LEXSY для изготовления вакцины.

Нейтрализация инфекции сывороткой, полученной рекомбинантным sHeV G. Вирусные частицы окрашены красным RAb4048: антитела выработаны с рекомбинантным sHeV G произведенным LEXSY
Рисунок 1: Нейтрализация инфекции сывороткой, полученной рекомбинантным sHeV G. Вирусные частицы окрашены красным RAb4048: антитела выработаны с рекомбинантным sHeV G произведенным LEXSY. Fischer et al., 2016[3].


Антигены Trypanosoma brucei gambiense

Trypanosoma brucei - возбудитель сонной болезни (африканский трипаносомоз)[4], разработка серодиагностических экспресс-тестов зависит от эффективного и доступного производства антигенов.
LEXSY был использован для производства внеклеточных доменов трех различных поверхностных антигенов Trypanosoma brucei (ISG65, VSG LiTat 1.3 и VSG LiTat 1.5) с выходом 10 мг/литр культуры (Rooney et al., 2015)[5]. Рекомбинантные антигены сравнивались с их естественными аналогами и показали аналогичный диагностический потенциал. Это показывает, что можно заменить естественный материал доступными рекомбинантными антигенами, синтезинрованными LEXSY.

Trypanosoma brucei gambiense антигены, синтезированные LEXSY. 1: ISG65, 2: LiTat 1.3, 3: LiTat 1.5
Рисунок 2: Trypanosoma brucei gambiense антигены, синтезированные LEXSY. 1: ISG65, 2: LiTat 1.3, 3: LiTat 1.5, A: 1 µg protein, B: 10 µg protein. Rooney et al., 2015[5].



HPV16 L1 вирусоподобные частицы

HPV16 (Папилломавирус человека) - ДНК вирус, способный вызывать рак шейки матки. Вирусоподобные частицы (VLP), например, вирусы без нуклеиновой кислоты, используются для вакцинации от папилломавируса.
HPV16 VLP были успешно синтезированы и собраны в LEXSY (Bolhassani et al., 2015)[6], что демонстрирует потенциал LEXSY как замены используемой в настоящее время неэффективной бакуловирус-подобной системы.

Собранная вирусоподобная частица HPV16, полученная в LEXSY (просвечивающий электронный микроскоп)
Рисунок 3: Собранная вирусоподобная частица HPV16, полученная в LEXSY (просвечивающий электронный микроскоп). Bolhassani et al., 2015[6].



Источники:

[1] Murray et al. (1995) A novel morbillivirus pneumonia of horses and its transmission to humans. Emerg. Infect. Dis. 1:31.

[2] Bowden et al. (2008) Structural basis of Nipah and Hendra virus attachment to their cell-surface receptor ephrin-B2. Nat. Struct. Mol. Biol. 15:567.

[3]   Fischer et al. (2016) Expression, characterisation and antigenicity of a truncated Hendra virus attachment protein expressed in the protozoan host Leishmania tarentolae. J. Virol. Methods 228:48.

[4] Malvy et al. (2011) Sleeping sickness. Clin. Microbiol. Infect. 17:986.

[5]   Rooney et al. (2015) Expression of Trypanosoma brucei gambiense Antigens in Leishmania tarentolae. Potential for Use in Rapid Serodiagnostic Tests (RDTs). PLoS Negl. Trop. Dis. 9.

[6]   Bolhassani et al. (2015) VLP production in Leishmania tarentolae: A novel expression system for purification and assembly of HPV16 L1. Protein Expr. Purif. 116:7.